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干货:一图看懂六大蛋白检测实验(WB、IF、FC等)
来源:华莲逸生物 发布日期:2026-06-08

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  Western Blot(WB)、免疫荧光(IF)、流式细胞术(FC)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫沉淀(IP)、免疫组化(IHC)是最常用的六大蛋白研究技术,这些实验该如何选择呢?


  1. 仅需检测蛋白表达量:优先 WB、ELISA、FC细胞 / 组织内总蛋白表达:WB(半定量 + 分子量验证);液体样本可溶性蛋白:ELISA(绝对定量、高灵敏度);单细胞表面 / 胞内蛋白 + 细胞分群:FC。


  2. 需明确蛋白定位:优先 IF、IHC体外培养细胞的亚细胞定位:IF(高分辨率、多色共定位);临床组织样本的空间分布:IHC(适配石蜡切片、临床适用性强)。


  3. 研究蛋白相互作用 / 富集低丰度蛋白:首选IP(CO-IP),是蛋白互作验证的核心实验,常搭配WB验证。GST-Pull down、Y2H、PLA、TurboID作为备选验证方法。


  4. 按样本类型选择细胞样本:WB、IF、FC、IP;液体样本(血清、上清):ELISA;组织样本:IHC、WB、IP;新鲜单细胞悬液:FC。


  5. 按定量精度选择绝对定量:ELISA;半定量:WB、IHC;单细胞定量:FC;IF以蛋白亚细胞定位定性为主,不推荐常规半定量。


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